Microaula em Método CELULA • Prévia Aberta

<p>Cultivar células aderidas ao fundo plano de plástico rígido de uma placa de Petri (cultura 2D) impõe condições mecânicas e nutricionais não fisiológicas: as células perdem sua polaridade tridimensional original, alteram sua expressão gênica e respondem de forma artificial a fármacos e toxinas. Para mimetizar fielmente a biologia dos tecidos orais e reduzir o uso de animais em consonância com o princípio dos 3Rs, a pesquisa de ponta em biologia oral migrou para sistemas de cultura 3D, esferóides e organóides orais perfundidos por microfluídica.</p>

Dissecamos a bioengenharia celular e os modelos tridimensionais avançados na pesquisa estomatológica. Analisamos primeiramente as Limitações Fisiológicas da Monocamada 2D: em 2D, as células sofrem deformação aberrante com adesões focais hiperdimensionadas e ausência de gradientes contínuos de oxigênio, nutrientes, metabólitos e moléculas de sinalização; em contrapartida, os Sistemas de Cultura Celular 3D recriam a morfologia esférica natural, as junções célula-célula (caderinas e conexinas) e a síntese autônoma de matriz extracelular (MEC). Dissecamos os Métodos de Geração de Esferóides: (1) Técnica da Gota Pendente (Hanging Drop): suspensões celulares são pipetadas na face interna da tampa de placas de cultura; a gravidade concentra as células no vértice inferior da gota, promovendo agregação espontânea em 24 a 48 horas; (2) Placas de Ultra-Baixa Adesão (ULA - Ultra-Low Attachment): revestidas com hidrogel de poliestireno hidrofílico neutro que impede a adesão celular ao substrato,...