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1. Circunstância (O Desafio no Mundo Real)

<p>O analista injeta diretamente um extrato bruto de fígado ou sangue hemolisado no cromatógrafo; a coluna cromatográfica de R$ 15.000 é entupida irreversivelmente por fosfolipídios e proteínas, e o sinal analítico sofre efeito de supressão de ionização (ion suppression) severo, gerando falso negativo.</p>

2. Fundamentos & Conceito Central (Estudos)

A complexidade das matrizes biológicas: presença de macromoléculas interferentes (proteínas plasmáticas, lipídios, fosfolipídios, sais minerais e produtos de putrefação cadavérica). O conceito de 'limpeza de amostra' (clean-up) e pré-concentração. Desproteinização por solventes orgânicos miscíveis (acetonitrila, metanol) ou ácidos (ácido tricloroacético). Hidrólise enzimática (beta-glicuronidase) para liberação de xenobióticos conjugados (morfina, canabinoides, benzodiazepínicos). Extração Líquido-Líquido (LLE): ajuste de pH (equação de Henderson-Hasselbalch para fármacos ácidos, básicos e neutros), escolha do coeficiente de partição e solventes orgânicos. Extração em Fase Sólida (SPE): fases reversas (C18), poliméricas hidrofílicas-lipofílicas balanceadas (HLB) e de troca iônica mista (MCX, WAX). Método QuEChERS e microextrações para pesticidas e amostras viscerais.

A Matriz Biológica Complexa: Proteínas, Lipídios e Supressão Iônica

Como os interferentes...

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