← Ver trilha completa Bacteriologia Clínica e Diagnóstica: Isolamento Patogênico, Teste de Sensibilidade (BrCAST), Mecanismos de Resistência e Automação

Célula 04: Bacilos Gram-Negativos (Enterobacterales e Não Fermentadores) e Bacilos Gram-Positivos

Taxonomia, vias metabólicas e baterias bioquímicas para identificação de bacilos Gram-negativos e Gram-positivos de interesse clínico: 1. Ordem Enterobacterales (Enterobactérias): bacilos Gram-negativos facultativos de grande impacto em infecções urinárias, intra-abdominais e sepse hospitalar; características fisiológicas comuns: oxidase-negativos (ausência de citocromo c oxidase, com exceção do gênero Plesiomonas), catalase-positivos, fermentadores obrigatórios de glicose (com ou sem produção de gás hidrogênio e dióxido de carbono) e redutores de nitrato a nitrito; Bateria Bioquímica Clássica em Tubos: Ágar Tríplice Açúcar e Ferro (TSI - Triple Sugar Iron): base de ágar contendo 0,1% de glicose no fundo, 1% de lactose e 1% de sacarose na rampa/bisel, tiossulfato de sódio e sulfato ferroso para detecção de H2S; interpretação de reações após 18-24 horas: fundo ácido amarelo (A) por fermentação de glicose; bisel ácido amarelo (A) por fermentação de lactose e/ou sacarose (padrão A/A típico de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Enterobacter cloacae); bisel alcalino vermelho (K) por exaustão da glicose e utilização oxidativa de peptonas em bactérias não fermentadoras de lactose/sacarose (padrão K/A típico de Salmonella spp., Shigella spp. e Proteus mirabilis); presença de bolhas ou quebra do ágar indicando produção de gás; e enegrecimento por precipitação de sulfeto ferroso indicando produção de H2S (Salmonella e Proteus mirabilis); Ágar Citrato de Simmons: utilização do citrato de sódio como única fonte de carbono e sais de amônio como fonte de nitrogênio com indicador azul de bromotimol (reação positiva com crescimento e viragem de verde para azul royal intenso em Klebsiella, Enterobacter e Salmonella; reação negativa permanecendo verde em E. coli e Shigella); Meio SIM (Sulfeto, Indol e Motilidade) e Meio MIO: motilidade pela turvação difusa além da linha de picada; produção de indol pela clivagem do triptofano pela enzima triptofanase, evidenciada pelo anel vermelho na superfície após adição do Reagente de Kovacs (indol positivo em Escherichia coli, Proteus vulgaris e Klebsiella oxytoca; indol negativo em Klebsiella pneumoniae e Proteus mirabilis); Teste de Vermelho de Metila (VM) e Voges-Proskauer (VP): via da fermentação ácida mista (VM positivo em E. coli) versus via do butanodiol com produção de acetoína (VP positivo em Klebsiella e Enterobacter); e Prova da Hidrólise da Ureia (Ágar Ureia de Christensen com indicador vermelho de fenol): hidrólise rápida com viragem para rosa choque brilhante em Proteus spp. (urease rápida patognomônica) e Klebsiella pneumoniae. 2. Bacilos Gram-Negativos Não Fermentadores (BGNNF): bactérias estritamente aeróbias que não utilizam carboidratos por via fermentativa: Pseudomonas aeruginosa: bacilo Gram-negativo aeróbio estrito, oxidase-positiva imediata, móvel por flagelo polar único, produção característica de pigmentos fenazínicos (piocianina azul e pioverdina verde fluorescente solúvel em água conferindo coloração verde-azulada e fluorescência sob luz UV nas colônias), odor adocicado característico de aminoacetofenona ('cheiro de uva' ou 'tortilha de milho') e utilização oxidativa da glicose demonstrada no meio OF de Hugh-Leifson (tubo aberto amarelo e tubo selado verde); Acinetobacter baumannii: cocobacilo Gram-negativo pleomórfico imóvel, oxidase-negativo, sacarolítico ou asacarolítico, de extrema persistência ambiental hospitalar em fômites e ventiladores mecânicos; Stenotrophomonas maltophilia: bacilo oxidase-negativo, catalase-positiva, móvel, caracterizado por resistência intrínseca universal a todos os antimicrobianos carbapenêmicos devido à produção constitutiva de metalobeta-lactamase cromossômica L1; e Burkholderia cepacia (patógeno oportunista em fibrose cística). 3. Bacilos Gram-Positivos de Relevância Médica: Esporulados: Gênero Bacillus: Bacillus anthracis (agente do antraz / carbúnculo, bacilo imóvel, capsulado, colônias com aspecto de 'cabeça de Medusa' e não hemolítico em Ágar Sangue) versus Bacillus cereus (móvel, beta-hemolítico, causador de intoxicação alimentar emeta e diarreica); Gênero Clostridioides e Clostridium (anaeróbios estritos esporulados): Clostridioides difficile (agente da colite pseudomembranosa e diarreia associada a antibióticos mediada pelas exotoxinas A enterotóxica e B citotóxica detectadas por ELISA ou PCR fecal), Clostridium tetani (esporos terminais deformantes em 'baqueta de tambor' com produção de tetanospasmina) e Clostridium perfringens (gangrena gasosa com dupla zona concêntrica de beta-hemólise em Ágar Sangue); Não Esporulados: Listeria monocytogenes: bacilo Gram-positivo curto intracelular facultativo, móvel com padrão característico de 'cambalhota' em gota pendente a 25°C e imóvel a 37°C, catalase-positiva, beta-hemólise estreita discreta, teste de CAMP positivo, hidrólise da esculina positiva e capacidade de replicação em temperaturas de refrigeração (4°C / psicrotrófica), sendo causa crítica de listeriose invasiva, sepse e meningoencefalite em gestantes, recém-nascidos e idosos; e Corynebacterium diphtheriae (difteria).

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1. Circunstância (O Desafio no Mundo Real)

<p>Taxonomia, vias metabólicas e baterias bioquímicas para identificação de bacilos Gram-negativos e Gram-positivos de interesse clínico: 1. Ordem Enterobacterales (Enterobactérias): bacilos Gram-negativos facultativos de grande impacto em infecções urinárias, intra-abdominais e sepse hospitalar; características fisiológicas comuns: oxidase-negativos (ausência de citocromo c oxidase, com exceção do gênero Plesiomonas), catalase-positivos, fermentadores obrigatórios de glicose (com ou sem produção de gás hidrogênio e dióxido de carbono) e redutores de nitrato a nitrito; Bateria Bioquímica Clássica em Tubos: Ágar Tríplice Açúcar e Ferro (TSI - Triple Sugar Iron): base de ágar contendo 0,1% de glicose no fundo, 1% de lactose e 1% de sacarose na rampa/bisel, tiossulfato de sódio e sulfato ferroso para detecção de H2S; interpretação de reações após 18-24 horas: fundo ácido amarelo (A) por fermentação de glicose; bisel ácido amarelo (A) por fermentação de lactose e/ou sacarose (padrão A/A típico de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Enterobacter cloacae); bisel alcalino vermelho (K) por exaustão da glicose e utilização oxidativa de peptonas em bactérias não fermentadoras de lactose/sacarose (padrão K/A típico de Salmonella spp., Shigella spp. e Proteus mirabilis); presença de bolhas ou quebra do ágar indicando produção de gás; e enegrecimento por precipitação de sulfeto ferroso indicando produção de H2S (Salmonella e Proteus mirabilis); Ágar Citrato de Simmons: utilização do citrato de sódio como única fonte de carbono e sais de amônio como fonte de nitrogênio com indicador azul de bromotimol (reação positiva com crescimento e viragem de verde para azul royal intenso em Klebsiella, Enterobacter e Salmonella; reação negativa permanecendo verde em E. coli e Shigella); Meio SIM (Sulfeto, Indol e Motilidade) e Meio MIO: motilidade pela turvação difusa além da linha de picada; produção de indol pela clivagem do triptofano pela enzima triptofanase, evidenciada pelo anel vermelho na superfície após adição do Reagente de Kovacs (indol positivo em Escherichia coli, Proteus vulgaris e Klebsiella oxytoca; indol negativo em Klebsiella pneumoniae e Proteus mirabilis); Teste de Vermelho de Metila (VM) e Voges-Proskauer (VP): via da fermentação ácida mista (VM positivo em E. coli) versus via do butanodiol com produção de acetoína (VP positivo em Klebsiella e Enterobacter); e Prova da Hidrólise da Ureia (Ágar Ureia de Christensen com indicador vermelho de fenol): hidrólise rápida com viragem para rosa choque brilhante em Proteus spp. (urease rápida patognomônica) e Klebsiella pneumoniae. 2. Bacilos Gram-Negativos Não Fermentadores (BGNNF): bactérias estritamente aeróbias que não utilizam carboidratos por via fermentativa: Pseudomonas aeruginosa: bacilo Gram-negativo aeróbio estrito, oxidase-positiva imediata, móvel por flagelo polar único, produção característica de pigmentos fenazínicos (piocianina azul e pioverdina verde fluorescente solúvel em água conferindo coloração verde-azulada e fluorescência sob luz UV nas colônias), odor adocicado característico de aminoacetofenona ('cheiro de uva' ou 'tortilha de milho') e utilização oxidativa da glicose demonstrada no meio OF de Hugh-Leifson (tubo aberto amarelo e tubo selado verde); Acinetobacter baumannii: cocobacilo Gram-negativo pleomórfico imóvel, oxidase-negativo, sacarolítico ou asacarolítico, de extrema persistência ambiental hospitalar em fômites e ventiladores mecânicos; Stenotrophomonas maltophilia: bacilo oxidase-negativo, catalase-positiva, móvel, caracterizado por resistência intrínseca universal a todos os antimicrobianos carbapenêmicos devido à produção constitutiva de metalobeta-lactamase cromossômica L1; e Burkholderia cepacia (patógeno oportunista em fibrose cística). 3. Bacilos Gram-Positivos de Relevância Médica: Esporulados: Gênero Bacillus: Bacillus anthracis (agente do antraz / carbúnculo, bacilo imóvel, capsulado, colônias com aspecto de 'cabeça de Medusa' e não hemolítico em Ágar Sangue) versus Bacillus cereus (móvel, beta-hemolítico, causador de intoxicação alimentar emeta e diarreica); Gênero Clostridioides e Clostridium (anaeróbios estritos esporulados): Clostridioides difficile (agente da colite pseudomembranosa e diarreia associada a antibióticos mediada pelas exotoxinas A enterotóxica e B citotóxica detectadas por ELISA ou PCR fecal), Clostridium tetani (esporos terminais deformantes em 'baqueta de tambor' com produção de tetanospasmina) e Clostridium perfringens (gangrena gasosa com dupla zona concêntrica de beta-hemólise em Ágar Sangue); Não Esporulados: Listeria monocytogenes: bacilo Gram-positivo curto intracelular facultativo, móvel com padrão característico de 'cambalhota' em gota pendente a 25°C e imóvel a 37°C, catalase-positiva, beta-hemólise estreita discreta, teste de CAMP positivo, hidrólise da esculina positiva e capacidade de replicação em temperaturas de refrigeração (4°C / psicrotrófica), sendo causa crítica de listeriose invasiva, sepse e meningoencefalite em gestantes, recém-nascidos e idosos; e Corynebacterium diphtheriae (difteria).</p>

2. Fundamentos & Conceito Central (Estudos)

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