Microaula em Método CELULA • Prévia Aberta

<p>Metrologia analítica, padronização e interpretação clínica do Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA / Antibiograma) em conformidade com as diretrizes normativas oficiais do BrCAST (Comitê Brasileiro do Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos) e EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing): padronização crítica do inóculo bacteriano na escala 0,5 de McFarland (\(1{,}5 imes 10^8 ext{ UFC/mL}\)) utilizando espectrofotômetro a 625 nm (absorbância 0,08 a 0,13) ou densitômetro calibrado a partir de colônias frescas com 18 a 24 horas de crescimento; consequências analíticas de desvios do inóculo (inóculo excessivo gerando falsos halos reduzidos e falsa resistência; inóculo insuficiente gerando halos aumentados espúrios). Métodos Fenotípicos de Teste de Sensibilidade: 1. Método de Difusão em Disco (Kirby-Bauer modificado): semeadura uniforme em tapete confluente em três direções com swab estéril em placas de Ágar Mueller-Hinton (espessura rigorosa de 4 mm +/- 0,5 mm; espessura &lt; 3 mm produz halos artificialmente aumentados e espessura &gt; 5 mm produz halos artificialmente diminuídos; pH controlado entre 7,2 e 7,4; concentração padronizada de cátions divalentes cálcio e magnésio essenciais para reprodutibilidade de aminoglicosídeos e polimixinas); para bactérias exigentes (Streptococcus pneumoniae, Streptococcus grupos A, B, C, G e Haemophilus): utilização de Ágar Mueller-Hinton suplementado com 5% de sangue de carneiro desfibrinado e 20 mg/L de beta-NAD (MH-F); aplicação de discos de papel filtro calibrados com massa antimicrobiana padronizada dentro do tempo máximo de 15 minutos pós-semeadura; incubação a 35°C +/- 1°C em aerobiose ou 5% CO2 por 16 a 20 horas; medição milimétrica rigorosa do diâmetro dos halos de inibição com paquímetro digital ou régua calibrada contra fundo escuro não reflexivo; 2. Determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM / MIC - Minimum Inhibitory Concentration): a menor concentração de um agente antimicrobiano capaz de inibir o crescimento bacteriano visível a olho nu; microdiluição em caldo em microplacas de 96 poços contendo caldo Mueller-Hinton com diluições seriadas dobradas (ex.: 0,125; 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8; 16... mg/L): método padrão-ouro de referência internacional mandatório para avaliação de colistina e vancomicina (para as quais a difusão em disco não é permitida pelo BrCAST devido à difusão errática de moléculas grandes); e Método de Fita de Gradiente de Concentração (Etest / M.I.C.Evaluator): tira plástica calibrada com gradiente exponencial contínuo pré-definido de antimicrobiano, permitindo a leitura direta do valor de CIM no ponto de interseção da elipse de inibição com a escala da fita. A Nova Nomenclatura e Categorização Clínica Interpretativa do BrCAST/EUCAST: superação da antiga definição ambígua de &#x27;Intermediário&#x27;: 1. Sensível (S): alta probabilidade de sucesso terapêutico utilizando o regime posológico padrão recomendado em bula; 2. Sensível Aumentando a Exposição (I - antigamente &#x27;Intermediário&#x27;): sucesso terapêutico assegurado desde que a exposição ao fármaco seja aumentada através do ajuste do regime de dosagem (dose mais elevada, infusão prolongada ou contínua) ou pela concentração fisiologicamente elevada do fármaco no sítio da infecção (ex.: concentração maciça de beta-lactâmicos na urina em infecções urinárias baixas); 3. Resistente (R): alta probabilidade de falha terapêutica mesmo com aumento de exposição do antimicrobiano; e Área de Incerteza Técnica (ATU - Area of Technical Uncertainty): faixa de valores limítrofes de halos ou CIM em que fatores analíticos laboratoriais podem gerar classificação incorreta, exigindo do microbiologista a re-testagem da amostra, utilização de método alternativo ou comunicação de alerta com nota interpretativa no laudo médico.</p>

Metrologia analítica, padronização e interpretação clínica do Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA / Antibiograma) em conformidade com as diretrizes normativas oficiais do BrCAST (Comitê Brasileiro do Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos) e EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing): padronização crítica do inóculo bacteriano na escala 0,5 de McFarland (\(1{,}5 imes 10^8 ext{ UFC/mL}\)) utilizando espectrofotômetro a 625 nm (absorbância 0,08 a 0,13) ou densitômetro calibrado a partir de colônias frescas com 18 a 24 horas de crescimento; consequências analíticas de desvios do inóculo (inóculo excessivo gerando falsos halos reduzidos e falsa resistência; inóculo insuficiente gerando halos aumentados espúrios). Métodos Fenotípicos de Teste de Sensibilidade: 1. Método de Difusão em Disco (Kirby-Bauer modificado): semeadura uniforme em tapete confluente em três direções com swab estéril em placas de Ágar Mueller-Hinton (espessura rigorosa de 4 m...