Microaula em Método CELULA • Prévia Aberta

<p>Estudo aprofundado da biologia do linfócito T: desde sua diferenciação ontogenética intratímica, seleção de repertório e estabelecimento da tolerância central até os mecanismos moleculares de ativação periférica, diferenciação em subpopulações de células T helper (Th1, Th2, Th17, Tfh e Treg) e funções citotóxicas mediadas por CTLs CD8+. A ontogenia tímica dos linfócitos T: progenitores linfoides originários da medula óssea chegam ao timo como timócitos duplo-negativos (DN: CD4- CD8-); nos estágios DN1 a DN4 ocorre o rearranjo somático dos genes que codificam a cadeia $\beta$ do TCR através das enzimas RAG-1 e RAG-2 e a enzima TdT; a expressão com sucesso do pré-TCR (cadeia $\beta$ pareada com a proteína invariante pT$\alpha$) gera sinais de sobrevivência e proliferação, induzindo a co-expressão de CD4 e CD8 (timócitos duplo-positivos - DP: CD4+ CD8+); no córtex tímico ocorre a recombinação dos segmentos da cadeia $\alpha$ do TCR e o processo de Seleção Positiva: timócitos cujos receptores interagem com afinidade moderada com moléculas de MHC próprio expressas em células epiteliais corticais tímicas (cTECs) recebem sinais de sobrevida e diferenciam-se em timócitos simples-positivos (SP: CD4+ ou CD8+, dependendo de terem reconhecido MHC II ou MHC I); timócitos sem afinidade morrem por negligência (mais de 90% das células geradas); na medula tímica, os timócitos simples-positivos enfrentam a Seleção Negativa (tolerância central): células epiteliais medulares tímicas (mTECs) expressam o fator de transcrição mestre AIRE (*Autoimmune Regulator*), que transcreve de forma promíscua milhares de antígenos específicos de tecidos periféricos (como insulina, tiroglobulina e proteínas da mielina); timócitos com afinidade excessivamente alta contra esses autoantígenos sofrem apoptose clonal imediata, prevenindo o escape de clones autorreativos para a circulação sistêmica. A Sinapse Imunológica e o modelo dos Três Sinais de ativação de linfócitos T virgens na periferia: Sinal 1 (especificidade): reconhecimento do complexo peptídeo-MHC pelo TCR, auxiliado pelos co-receptores CD4 (que se liga ao domínio $\beta_2$ do MHC II) ou CD8 (que se liga ao domínio $\alpha_3$ do MHC I), ativando as caudas citoplasmáticas de CD3 e cadeias $\zeta$ com motivos ITAMs via quinases Lck e ZAP-70; Sinal 2 (co-estimulação para sobrevivência): interação essencial entre a molécula CD28 do linfócito T e as moléculas co-estimuladoras B7-1 (CD80) e B7-2 (CD86) expressas na APC madura; a ausência do Sinal 2 induz anergia clonal (inativação funcional permanente) ou apoptose; receptores inibitórios homólogos competem por B7 para atuar como pontos de checagem imune (*immune checkpoints*): CTLA-4 (de altíssima afinidade, expressa após ativação e constitutivamente em Tregs) e PD-1 (ligando-se a PD-L1 em células inflamatórias ou neoplásicas para inibir a fosforilação); Sinal 3 (direcionamento funcional): o perfil de citocinas polares solúveis presentes no microambiente durante a sinapse determina a polarização transcricional do linfócito T helper CD4+: 1) Perfil Th1: induzido por IL-12 e IFN-$\gamma$, mediado pelo fator de transcrição T-bet; secreta massivamente IFN-$\gamma$ e TNF-$\alpha$; ativa macrófagos para destruição de patógenos intracelulares (bactérias e protozoários como *Mycobacterium tuberculosis* e *Leishmania*); 2) Perfil Th2: induzido por IL-4, mediado pelo fator de transcrição GATA-3; secreta IL-4 (induz troca de classe para IgE), IL-5 (recrutamento e ativação de eosinófilos) e IL-13 (hipersecreção de muco e peristaltismo intestinal); orquestra a defesa contra infecções por helmintos e parasitas multicelulares e patogênese de alergias; 3) Perfil Th17: induzido pela combinação de TGF-$\beta$, IL-6, IL-1 e IL-23, dependente do fator ROR$\gamma$t; secreta IL-17A, IL-17F e IL-22; induz o recrutamento massivo de neutrófilos e a produção de peptídeos antimicrobianos pelos epitélios, vital para a contenção de bactérias extracelulares e fungos (*Candida albicans*), associado a doenças autoimunes inflamatórias; 4) Perfil Tfh (T follicular helper): induzido por IL-6 e IL-21, governado por Bcl-6 e marcado por CXCR5; migra para os folículos linfoides para instruir as células B no centro germinativo; 5) Linfócitos T Reguladores (Tregs): marcados constitutivamente por CD4, CD25 e o fator de transcrição FoxP3; exercem supressão imunológica através da secreção de citocinas anti-inflamatórias (IL-10 e TGF-$\beta$), consumo de IL-2 por afinidade extrema e expressão contínua de CTLA-4. Mecanismos citotóxicos executores dos Linfócitos T CD8+ CTLs: adesão específica ao alvo via TCR/MHC-I, polarização do citoesqueleto com redirecionamento do complexo de Golgi e exocitose direcionada de grânulos citotóxicos contendo a proteína formadora de poros Perforina e serina-proteases Granzimas (especialmente Granzima B, que cliva a pro-caspase-3 e a proteína Bid, deflagrando a cascata apoptótica mitocondrial dependente de citocromo c na célula-alvo); via citotóxica acessória mediada pelo ligante Fas (FasL) expresso no CTL ligando-se ao receptor de morte Fas (CD95) no alvo, ativando a caspase-8 diretamente.</p>

Estudo aprofundado da biologia do linfócito T: desde sua diferenciação ontogenética intratímica, seleção de repertório e estabelecimento da tolerância central até os mecanismos moleculares de ativação periférica, diferenciação em subpopulações de células T helper (Th1, Th2, Th17, Tfh e Treg) e funções citotóxicas mediadas por CTLs CD8+. A ontogenia tímica dos linfócitos T: progenitores linfoides originários da medula óssea chegam ao timo como timócitos duplo-negativos (DN: CD4- CD8-); nos estágios DN1 a DN4 ocorre o rearranjo somático dos genes que codificam a cadeia $\beta$ do TCR através das enzimas RAG-1 e RAG-2 e a enzima TdT; a expressão com sucesso do pré-TCR (cadeia $\beta$ pareada com a proteína invariante pT$\alpha$) gera sinais de sobrevivência e proliferação, induzindo a co-expressão de CD4 e CD8 (timócitos duplo-positivos - DP: CD4+ CD8+); no córtex tímico ocorre a recombinação dos segmentos da cadeia $\alpha$ do TCR e o processo de Seleção Positiva: timócitos cujos rece...