Microaula em Método CELULA • Prévia Aberta

<p>Bases biológicas da hematopoiese humana, pré-analítica e princípios físicos da contagem automatizada: organização da célula-tronco hematopoiética pluripotente (HSC caracterizada pelo marcador antigênico CD34+); linhagem mieloide (diferenciação em eritrócitos, plaquetas por megacariócitos, monócitos e granulócitos neutrófilos, eosinófilos e basófilos) e linhagem linfoide (linfócitos B, T e células NK); fatores de crescimento hematopoiéticos recombinantes e endógenos: eritropoietina (EPO sintetizada pelas células intersticiais renais em resposta à hipóxia tecidual), trombopoietina (TPO hepática reguladora da maturação megacariocítica), fator estimulador de colônias de granulócitos (G-CSF) e interleucinas (IL-3, IL-7); arquitetura estromal e nicho medular da medula óssea vermelha. Boas práticas na fase pré-analítica em hematologia: punção venosa estéril sem garroteamento prolongado (para evitar hemoconcentração e lise celular); tubo com anticoagulante EDTA dipotássico (K2-EDTA) ou tripotássico (K3-EDTA) na proporção rigorosa de 1,5 a 2,2 mg de sal por mL de sangue total; consequências analíticas de erros de homogeneização e proporção: subpreenchimento do tubo com sangue (excesso relativo de EDTA provocando desidratação osmótica dos eritrócitos com retração celular, gerando falsa redução do VCM e aumento espúrio do CHCM) e sobrepreenchimento (insuficiência de anticoagulante com formação de microcoágulos de fibrina, causando consumo falso de plaquetas com pseudotrombocitopenia e obstrução de capilares dos analisadores automáticos); estabilidade temporal da amostra: estabilidade aceitável de parâmetros quantitativos por até 24 horas a 4°C, com exigência mandatória de confecção do esfregaço sanguíneo em no máximo 4 horas pós-coleta para prevenir artefatos degenerativos (vacuolização nuclear e degeneração picnótica de neutrófilos). Princípios biofísicos da automação hematológica: 1. Princípio Coulter / Impedância Elétrica: células sanguíneas suspensas em eletrólito condutor atravessam uma abertura calibrada (orifício) por onde flui uma corrente elétrica contínua; a passagem de uma célula não condutora provoca uma alteração momentânea de resistência elétrica (impedância), gerando um pulso de voltagem: o número de pulsos elétricos é diretamente proporcional à contagem celular e a amplitude/altura do pulso é diretamente proporcional ao volume celular (gerando os histogramas de distribuição volumétrica de hemácias, plaquetas e leucócitos); 2. Citometria de Fluxo Óptica por Dispersão de Luz Laser (Laser Semicondutor): alinhamento celular em fluxo laminar monofilamentar (focalização hidrodinâmica) interceptado por feixe de laser: dispersão de luz frontal em ângulo baixo (Forward Scatter - FSC, indicativa do tamanho celular e volume físico) e dispersão de luz lateral em ângulo de 90° (Side Scatter - SSC, indicativa da complexidade interna celular, densidade nuclear e conteúdo de granulações citoplasmáticas); combinação bidimensional FSC vs. SSC gerando os gráficos de dispersão (scattergrams) que separam claramente as populações de neutrófilos, linfócitos, monócitos e eosinófilos; 3. Fluorescência de Ácidos Nucleicos: corantes polimíticos de polimetina que marcam RNA residual em reticulócitos e plaquetas reticuladas. Confecção e coloração do esfregaço de sangue periférico: técnica da distensão em cunha sobre lâmina de vidro limpa e desengordurada (ângulo de 30° a 45°, movimento contínuo e uniforme); identificação da &#x27;zona ideal de leitura&#x27; monocelular (onde as hemácias encontram-se dispostas lado a lado sem sobreposição e sem distorção mecânica); coloração hematológica com corantes panópticos derivados de Romanowsky (mistura equimolar de corante ácido eosina Y que cora citoplasma e grânulos básicos de eosinófilos em vermelho-alaranjado, e corante básico azul de metileno e seus derivados azures que coram núcleos, cromatina e grânulos basofílicos em azul-violeta escuro); controle do pH da água tamponada entre 6,8 e 7,2 para garantir a neutralidade da diferenciação cromática celular.</p>

Bases biológicas da hematopoiese humana, pré-analítica e princípios físicos da contagem automatizada: organização da célula-tronco hematopoiética pluripotente (HSC caracterizada pelo marcador antigênico CD34+); linhagem mieloide (diferenciação em eritrócitos, plaquetas por megacariócitos, monócitos e granulócitos neutrófilos, eosinófilos e basófilos) e linhagem linfoide (linfócitos B, T e células NK); fatores de crescimento hematopoiéticos recombinantes e endógenos: eritropoietina (EPO sintetizada pelas células intersticiais renais em resposta à hipóxia tecidual), trombopoietina (TPO hepática reguladora da maturação megacariocítica), fator estimulador de colônias de granulócitos (G-CSF) e interleucinas (IL-3, IL-7); arquitetura estromal e nicho medular da medula óssea vermelha. Boas práticas na fase pré-analítica em hematologia: punção venosa estéril sem garroteamento prolongado (para evitar hemoconcentração e lise celular); tubo com anticoagulante EDTA dipotássico (K2-EDTA) ou trip...