Microaula em Método CELULA • Prévia Aberta

<p>Bases biológicas, citológicas e taxonômicas do Reino Fungi no diagnóstico médico laboratorial: organização estrutural eucariótica, carioteca definida, organelas membranosas, vacúolos citoplasmáticos e mitocôndrias; ultraestrutura e composição bioquímica da parede celular fúngica: matriz tridimensional complexa formada por microfibrilas rígidas de quitina (polímero linear de N-acetilglucosamina insolúvel), polissacarídeos estruturais entrelaçados de beta-1,3-D-glucana e beta-1,6-D-glucana (alvos terapêuticos específicos da classe das equinocandinas) e manoproteínas externas hidrofóbicas determinantes de adesão e reconhecimento imunológico; ultraestrutura da membrana plasmática fúngica: bicamada lipídica rica em esteróis específicos, destacando-se o ergosterol como principal constituinte membranar (que substitui o colesterol das células animais humanas, atuando como o alvo seletivo principal de antifúngicos polienos como anfotericina B e da enzima lanosterol 14-alfa-desmetilase inibida pelos derivados azólicos). Conceito fundamental de Dimorfismo Fúngico Térmico: capacidade adaptativa patogênica de determinados fungos de alternar entre duas fases morfológicas distintas dependendo da temperatura ambiental: fase micelial/filamentosa saprofítica no solo e em temperatura ambiente (25°C a 28°C) produzindo conídios infectantes inaláveis ou inoculáveis, e fase leveduriforme parasitária/tecidual no organismo hospedeiro a 37°C. Metodologia pré-analítica de coleta e transporte de espécimes clínicos em micologia: 1. Lesões cutâneas e descamativas: assepsia prévia com álcool a 70% para eliminação de flora bacteriana superficial contaminante e remoção de cosméticos/pomadas aplicadas; raspagem rigorosa da borda ativa da lesão (zona de maior proliferação fúngica ativa) utilizando lâmina de bisturi estéril descartável nº 15 em ângulo de 45° sobre placa de Petri estéril ou papel de filtro seco; 2. Lesões ungueais (onicomicoses): raspagem vigorosa do leito ungueal subungueal distal e proximal após corte e descarte da borda ungueal externa espessada e contaminada; 3. Pelos e couro cabeludo (tineas capitis): epilação cuidadosa dos pelos acometidos pela raiz utilizando pinça estéril (a haste quebradiça e o bulbo contêm os artroconídios de invasão), associada à raspagem suave de escamas perilesionais; 4. Secreções respiratórias, líquor e fragmentos teciduais de biópsia: envio imediato em frasco estéril sem formalina. O Exame Micológico Direto (EMD): técnica analítica prioritária de triagem rápida: fundamentação do uso do hidróxido de potássio (KOH) em concentrações de 10% (líquidos e secreções fluidas), 20% (escamas de pele e pelos) e 40% (fragmentos ungueais queratinizados e espessos): o KOH é uma base forte que atua como agente ceratolítico e cáustico, dissolvendo a queratina amorfa tecidual celular e desintegrando debris celulares humanos sem degradar a parede fúngica rica em quitina e glucana; associação com dimetilsulfóxido (DMSO a 40%) acelerando a penetração do álcali e a clarificação em temperatura ambiente sem necessidade de aquecimento excessivo na chama (o qual pode cristalizar o reagente e criar falsos artefatos morfológicos em teia de aranha); preparo microscópico entre lâmina e lamínula, tempo de repouso de 15 a 30 minutos em câmara úmida; métodos tintoriais especiais no EMD: 1. Azul de Algodão em Lactofenol (LPCB - Lactophenol Cotton Blue): o fenol inativa e mata os fungos, o ácido lático preserva a integridade estrutural interna e o azul de algodão cora a quitina externa das paredes em azul brilhante; 2. Coloração com Tinta da China / Nanquim comercial para visualização de cápsula polissacarídica espessa refringente como halo translúcido claro sobre fundo escuro opaco; 3. Coloração de Giemsa/Wright para formas de leveduras intracelulares em macrófagos de esfregaços de medula óssea ou aspirado ganglionar; e 4. Microscopia de fluorescência com Calcoflúor Branco (fluorocromo óptico que se liga especificamente às ligações beta da quitina e celulose, emitindo fluorescência branco-azulada sob excitação UV em microscópio de epifluorescência). Controle de qualidade analítico do EMD: identificação rigorosa de artefatos microscópicos comuns que simulam estruturas fúngicas (fibras de algodão e celulose, cristais de colesterol e talco, bordas celulares de queratinócitos formando a &#x27;rede de mosaico&#x27; queratínica simulando hifas septadas e bolhas de ar).</p>

Bases biológicas, citológicas e taxonômicas do Reino Fungi no diagnóstico médico laboratorial: organização estrutural eucariótica, carioteca definida, organelas membranosas, vacúolos citoplasmáticos e mitocôndrias; ultraestrutura e composição bioquímica da parede celular fúngica: matriz tridimensional complexa formada por microfibrilas rígidas de quitina (polímero linear de N-acetilglucosamina insolúvel), polissacarídeos estruturais entrelaçados de beta-1,3-D-glucana e beta-1,6-D-glucana (alvos terapêuticos específicos da classe das equinocandinas) e manoproteínas externas hidrofóbicas determinantes de adesão e reconhecimento imunológico; ultraestrutura da membrana plasmática fúngica: bicamada lipídica rica em esteróis específicos, destacando-se o ergosterol como principal constituinte membranar (que substitui o colesterol das células animais humanas, atuando como o alvo seletivo principal de antifúngicos polienos como anfotericina B e da enzima lanosterol 14-alfa-desmetilase inibid...