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<p>Epidemiologia clínica, diagnóstico rápido e teste de sensibilidade aos antifúngicos nas infecções fúngicas invasivas (IFI) em pacientes imunossuprimidos, transplantados de órgãos sólidos e medula óssea, onco-hematológicos, internados em UTI e com dispositivos intravasculares: 1. Criptococose: causada pelo complexo Cryptococcus neoformans (sorotipos A, D - associado a imunodeprimidos, pacientes com infecção por HIV/Aids e neoplasias hematológicas) e complexo Cryptococcus gattii (sorotipos B, C - primariamente em pacientes imunocompetentes com grande predileção por acometimento do sistema nervoso central e formação de criptococomas pulmonares e cerebrais): principal causa de meningoencefalite fúngica subaguda; rotina diagnóstica no líquido cefalorraquidiano (LCR / líquor): centrifugação e análise imediata do sedimento liquórico; exame direto com Tinta da China (nanquim a fresco): visualização de leveduras esféricas brotantes birrefringentes com halo capsular negativo translúcido volumoso (composto pelo polissacarídeo imunossupressor capsular glucuronoxilomanana - GXM); teste imunocromatográfico de fluxo lateral de captura de Antígeno Criptocócico (CrAg LFA): método rápido padrão-ouro com sensibilidade e especificidade superiores a 98%, dispensando refrigeração e permitindo diagnóstico precoce em sangue total, soro e líquor; cultivo em Ágar Semente de Girassol / Ágar Staib (Birdseed agar / Guizotia abyssinica): produção de pigmento marrom-café ou negro em virtude da atividade enzimática da fenoloxidase fúngica que sintetiza melanina a partir do ácido cafeico, diferenciando Cryptococcus de outras leveduras. 2. Candidíase Invasiva e Candidemia: infecções de corrente sanguínea associadas a cateteres venosos centrais, cirurgias abdominais de grande porte, antibioticoterapia de amplo espectro prolongada e nutrição parenteral total: perfil epidemiológico e taxonomia: diferenciação acurada das espécies do complexo Candida: Candida albicans (sensível a fluconazol na maioria dos isolados), Candida glabrata (Nakaseomyces glabratus - leveduras muito pequenas sem pseudohifas, com resistência intrínseca ou suscetibilidade dose-dependente aos derivados azólicos), Candida parapsilosis (elevada propensão a formação de biofilmes em materiais plásticos de cateter e soluções parenterais lipídicas), Candida tropicalis (virulência acentuada em neutropênicos) e a emergência mundial crítica de Candida auris (levedura multirresistente ou pan-resistente com transmissão nosocomial hospitalar clonal, capacidade de persistência ambiental em superfícies inanimadas e frequente falha de identificação por métodos bioquímicos manuais convencionais). 3. Aspergilose Invasiva: causada por espécies do gênero Aspergillus (Aspergillus fumigatus, A. flavus, A. terreus com resistência intrínseca a anfotericina B, e A. niger): acometimento pulmonar invasivo fulminante e angioinvasivo com trombose vascular e necrose tecidual; diagnóstico microscópico: presença no exame histológico ou LBA de Hifas Hialinas Septadas com Ramificação Dicotômica Progressiva em Ângulo Agudo Estrito de 45° (diferenciação crítica em relação a Mucorales); pesquisa de biomarcadores antigênicos solúveis: dosagem imunoenzimática sérica e em lavado broncoalveolar de Galactomanana (polissacarídeo da parede aspergilar liberado durante o crescimento fúngico ativo, com índice de corte positivo de densidade óptica no soro superior a 0,5); dosagem de Beta-D-Glucana sérica como biomarcador panfúngico de triagem. 4. Mucormicose (Zigomicose): infecção fúngica angiodestrutiva de evolução hiperaguda e catastrófica provocada por fungos da ordem Mucorales (gêneros Rhizopus, Mucor e Lichtheimia) em pacientes diabéticos em cetoacidose descompensada ou neutropênicos graves (mucormicose rino-órbito-cerebral e pulmonar): achado microscópico clássico de hifas hialinas muito largas (calibrosas de 10 a 25 micrometros), paucisseptadas (não septadas ou com septação muito esparsa), pregueadas, com ramificações irregulares em Ângulo Reto de 90°. 5. Teste de Sensibilidade aos Antifúngicos (Antifungigrama / TSA Micológico): normatização metodológica oficial segundo o BrCAST (Comitê Brasileiro de Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos) em alinhamento com o EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) e normas de referência do CLSI M27 (leveduras) e CLSI M38 (fungos filamentosos): método de microdiluição em caldo em microplacas de poliestireno de 96 poços com fundo em U: meio de cultura de referência padronizado: caldo RPMI-1640 suplementado com glutamina e glicose a 2% tamponado com ácido MOPS a pH 7,0; padronização espectrofotométrica estrita do inóculo celular fúngico a 530 nm (0,5 a 2,5 x 10^3 UFC/mL para leveduras); avaliação da Concentração Inibitória Mínima (CIM / MIC): a menor concentração de antifúngico capaz de inibir o crescimento fúngico visível (com leitura de 100% de inibição para polienos como anfotericina B e 50% de inibição relativa comparada ao controle para derivados azólicos e equinocandinas); método de Difusão por Fita de Gradiente de Concentração (Etest / MTS) em Ágar RPMI com glicose a 2% e azul de metileno; novas categorias clínicas do BrCAST: Sensível (S), Sensível com Exposição Aumentada (I) e Resistente (R); identificação dos mecanismos de resistência molecular: mutações no gene ERG11 e bombas de efluxo (genes CDR e MDR) em resistência aos azólicos, e mutações &#x27;hot-spot&#x27; nos genes FKS1 e FKS2 conferindo resistência às equinocandinas em Candida albicans e Candida glabrata; identificação automatizada rápida por espectrometria de massas MALDI-TOF MS (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight) baseada na espectrometria de perfis peptídicos ribossomais; e vigilância epidemiológica e controle de infecção hospitalar sob a NBR ISO 15189.</p>

Epidemiologia clínica, diagnóstico rápido e teste de sensibilidade aos antifúngicos nas infecções fúngicas invasivas (IFI) em pacientes imunossuprimidos, transplantados de órgãos sólidos e medula óssea, onco-hematológicos, internados em UTI e com dispositivos intravasculares: 1. Criptococose: causada pelo complexo Cryptococcus neoformans (sorotipos A, D - associado a imunodeprimidos, pacientes com infecção por HIV/Aids e neoplasias hematológicas) e complexo Cryptococcus gattii (sorotipos B, C - primariamente em pacientes imunocompetentes com grande predileção por acometimento do sistema nervoso central e formação de criptococomas pulmonares e cerebrais): principal causa de meningoencefalite fúngica subaguda; rotina diagnóstica no líquido cefalorraquidiano (LCR / líquor): centrifugação e análise imediata do sedimento liquórico; exame direto com Tinta da China (nanquim a fresco): visualização de leveduras esféricas brotantes birrefringentes com halo capsular negativo translúcido volum...