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1. Circunstância (O Desafio no Mundo Real)

<p>Epidemiologia diagnóstica, vigilância laboratorial e investigação molecular de arboviroses urbanas, vírus respiratórios epidêmicos/pandêmicos e patógenos virais emergentes: 1. Arboviroses transmitidas por artrópodes vetores (Aedes aegypti e Aedes albopictus): 1. Vírus da Dengue (DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4 - família Flaviviridae): dinâmica temporal diagnóstica escalonada rigorosamente pelos dias de evolução dos sintomas clínicos: Fase Aguda Virêmica Precoce (do 1º ao 5º dia de febre): métodos diagnósticos de escolha: detecção do antígeno solúvel não estrutural NS1 por ELISA de captura ou imunocromatografia de alta sensibilidade (o antígeno NS1 é secretado abundantemente pelos monócitos e hepatócitos infectados) e RT-qPCR em tempo real para identificação e sorotipagem do RNA viral de DENV; Fase Imune Tardia (a partir do 6º dia pós-início da febre): os níveis de viremia e antígeno NS1 declinam vertiginosamente, tornando mandatório o diagnóstico sorológico pela pesquisa de anticorpos Anti-Dengue IgM específicos por ELISA de captura (MAC-ELISA) e titulação de Anti-Dengue IgG pareada (uma elevação de 4 vezes nos títulos de IgG entre a fase aguda e convalescente confirma infecção secundária com risco acentuado de Dengue Grave / extravasamento plasmático e choque hemorrágico); marcadores hematológicos e metabólicos de alarme laboratorial crítico: hemoconcentração abrupta (elevação do hematócrito acima de 20% do basal indicando choque por fuga capilar), trombocitopenia acentuada (&lt; 100.000 plaquetas/microL) e elevação precoce de aminotransferases (AST/ALT); 2. Vírus Chikungunya (CHIKV - família Togaviridae, gênero Alphavirus): apresentação clínica com poliartrite e artralgia periférica simétrica bilateral intensamente incapacitante: diagnóstico por RT-qPCR em tempo real (sensibilidade máxima do 1º ao 8º dia de sintomas) e pesquisa de anticorpos específicos Anti-CHIKV IgM por ELISA a partir do 8º dia pós-sintomas; 3. Vírus Zika (ZIKV - família Flaviviridae): exantema maculopapular pruriginoso, febre baixa e risco severo de Síndrome Congênita do Zika com microcefalia fetal, atrofia cerebral e calcificações do SNC, além de Síndrome de Guillain-Barré em adultos: diagnóstico molecular por RT-qPCR em tempo real em amostras de sangue (1º ao 5º dia) e urina (onde a excreção viral e a detecção de ZIKV-RNA prolongam-se por até 15 a 20 dias pós-infecção); alerta sorológico de reação cruzada intensa de anticorpos IgM/IgG com outros flavivírus (Dengue e Febre Amarela), exigindo confirmação por RT-qPCR ou Teste de Neutralização por Redução de Placas (PRNT); 4. Vírus da Febre Amarela (YFV - Flaviviridae): arbovirose hemorrágica silvestre (vetores Haemagogus e Sabethes) e urbana com necrose hepática maciça e insuficiência renal: diagnóstico por RT-qPCR de YFV-RNA e sorologia MAC-ELISA. 2. Vírus Respiratórios Sazonais e Pandêmicos: 1. Vírus Influenza A (H1N1, H3N2) e Influenza B (família Orthomyxoviridae): vírus envelopados com genoma de RNA segmentado em 8 fitas: mecanismos de evolução antigênica: Drift Antigênico (mutações pontuais anuais nos genes das espículas de hemaglutinina - HA e neuraminidase - NA, exigindo reformulação anual das vacinas) versus Shift Antigênico (reassortimento genômico completo entre cepas humanas, suínas e aviárias, gerando novos subtipos pandêmicos com ausência de imunidade populacional prévia); 2. Vírus Sincicial Respiratório (VSR - Pneumoviridae): principal causa de bronquiolite e pneumonia viral em lactentes; 3. Coronavírus Humanos e SARS-CoV-2 (COVID-19 - gênero Betacoronavirus): diagnóstico padrão-ouro por RT-qPCR multiplex em tempo real para múltiplos alvos genômicos (genes da polimerase dependente de RNA - RdRp, envelope - E e nucleocapsídeo - N) e testes rápidos de antígeno para proteína N; vigilância genômica de Variantes de Preocupação (VOCs) por sequenciamento de nova geração (NGS). 3. Vírus Emergentes e Reemergentes de Importância Sanitária Global: Mpox (família Poxviridae, gênero Orthopoxvirus, vírus de DNA de fita dupla envelopado): transmissão por contato cutâneo direto com lesões vesiculares e crostas: diagnóstico molecular por qPCR em tempo real em swab de lesões ativas sob biossegurança NB-2; Vírus Oropouche (OROV - família Peribunyaviridae): arbovirose reemergente no Brasil transmitida pelo mosquito-pólvora ou maruim (Culicoides paraensis), diagnosticada por RT-qPCR; Febres Hemorrágicas Virais por Filovírus (Vírus Ebola e Marburg) manuseados sob contenção máxima de Biossegurança Nível 4 (NB-4); Hantavírus (Síndrome Cardiopulmonar por Hantavírus transmitida por inalação de aerossóis secos de urina e excretas de roedores silvestres); biossegurança laboratorial, descarte de resíduos infectantes e notificação compulsória imediata no Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) conforme as normas da RDC ANVISA nº 786/2023 e NBR ISO 15189.</p>

2. Fundamentos & Conceito Central (Estudos)

Epidemiologia diagnóstica, vigilância laboratorial e investigação molecular de arboviroses urbanas, vírus respiratórios epidêmicos/pandêmicos e patógenos virais emergentes: 1. Arboviroses transmitidas por artrópodes vetores (Aedes aegypti e Aedes albopictus): 1. Vírus da Dengue (DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4 - família Flaviviridae): dinâmica temporal diagnóstica escalonada rigorosamente pelos dias de evolução dos sintomas clínicos: Fase Aguda Virêmica Precoce (do 1º ao 5º dia de febre): métodos diagnósticos de escolha: detecção do antígeno solúvel não estrutural NS1 por ELISA de captura ou imunocromatografia de alta sensibilidade (o antígeno NS1 é secretado abundantemente pelos monócitos e hepatócitos infectados) e RT-qPCR em tempo real para identificação e sorotipagem do RNA viral de DENV; Fase Imune Tardia (a partir do 6º dia pós-início da febre): os níveis de viremia e antígeno NS1 declinam vertiginosamente, tornando mandatório o diagnóstico sorológico pela pesquisa de anticorpo...

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